一、儀器操作 

1) 準(zhǔn)備：shou先將內(nèi)層滅菌桶取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。一般來說每次滅菌前都應(yīng)該加水。加水不能太少，否則會引起燒干或者爆裂。 加水**好加去離子水或蒸餾水，這樣產(chǎn)生的水垢少些，而且鍋體不容易被腐蝕。 

2）放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。 

3）加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時(shí)旋緊相對的兩個(gè)螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。     4）用電爐或煤氣加熱，并同時(shí)打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí)，控制熱源，維持壓力**所需時(shí)間（在溫度或者壓力達(dá)到所需時(shí)（一般為121°0.1MPa），需要切斷電源，停止加熱。當(dāng)溫度下降時(shí)，再開啟電源開始加熱，使溫度維持在恒定的范圍之內(nèi)。因?yàn)闇囟忍瓦_(dá)不到滅菌效果，太高可能會出危險(xiǎn)。現(xiàn)在市場上手提滅菌鍋實(shí)現(xiàn)了控制自動化，不過因?yàn)闇缇鷫毫Ρ容^大，**好還是有人在現(xiàn)場比較保險(xiǎn)）。 

5）滅菌所需時(shí)間到后，切斷電源或關(guān)閉煤氣，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降**0時(shí)，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，10分鐘后取出滅菌物品。如果壓力未降到0時(shí)，打開排氣閥，就會因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的液體由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。將準(zhǔn)備滅菌的培養(yǎng)基及空玻璃器皿用牛皮紙包好，裝入鍋內(nèi)套層中，物品放置不宜過多，過擠，鍋內(nèi)應(yīng)留出三分之一空間。然后蓋嚴(yán)鍋蓋，采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋，關(guān)閉鍋蓋上的氣閥。 

 

二、維護(hù)與注意事項(xiàng)： 1.滅菌物品不能堆得太滿、太緊，以免影響溫度均勻上升。 2.降溫時(shí)待溫度自然降**60℃以下再打開箱門取出物品，以免 因溫度過高而驟然降溫導(dǎo)致玻璃器皿炸裂 

3. 在滅菌過程中，應(yīng)注意排凈鍋內(nèi)冷空氣，鍋內(nèi)冷空氣如排放不凈，會影響滅菌效果，達(dá)不到徹底滅菌的目的。由于高壓蒸汽滅菌時(shí)，要使用溫度高達(dá)120℃、兩個(gè)大氣壓的過熱蒸汽，操作時(shí)，必須嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作，否則容易發(fā)生意外事故。 

在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，其原因有三：一是濕熱中細(xì)菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固溫度降低，二是濕熱的穿透力比干熱大；三是濕熱的蒸汽有潛熱存在，每1克水在100℃時(shí)，由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可放出2．26kJ（千焦）的熱量。這種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從而增加滅菌效力。  

    在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否完全極為重要，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒羝呐蛎泬海裕?dāng)水蒸汽中含有空氣時(shí)，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。