驗證方案
目 錄
1. 概述
2. 驗證目的
3. 驗證范圍
4. 支持文件
5. 驗證項目小組成員與職責
6. 驗證計劃安排
7. 驗證參數及判斷標準
8. 驗證內容
9. 偏差及變更處理
10.驗證結果評價
11.驗證結論
12.再驗證周期
13.驗證結果的實施
14.附錄
1.概述
LDZX-75KBS
立式壓力蒸汽滅菌器是利用高壓高溫濕熱蒸汽殺死細菌。其體積小，受熱均勻，是用于食品和藥品微生物檢查中培養基、微生物檢查用器具、衣物的滅菌消毒。
滅菌器的滅菌效果直接影響到樣品微生物檢查結果的準確性和可靠性。因此，對于
滅菌器的驗證應是定期且必要的。
2.驗證目的
驗證LDZX-75KBS
立式壓力蒸汽滅菌器滅菌效果的有效性和可靠性。確保滅菌條件定在121±1℃、15分鐘條件下，對所需滅菌物品能夠進行有效的滅菌，從而保證衛生學檢查結果的可靠性。
3.驗證范圍：
LDZX-75KBS
立式壓力蒸汽滅菌器性能確認。（壓力表經過校驗合格）
4.支持文件
LDZX-75KBS立式壓力
蒸汽滅菌器操作規程 文件編號
×××型隔水式恒溫培養箱操作規程 文件編號
×××垂直層流潔凈工作臺操作規程 文件編號
×××型電熱恒溫鼓風干燥箱操作規程 文件編號
生物指示劑說明書
5.驗證項目小組成員與職責
驗證
項目小組 |
職務 |
部門 |
職責與崗位 |
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組長 |
質量部 |
負責檢驗結果的**后評價和驗證方案的審核；負責整個驗證的組織及評價（質量部 經理） |
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組員 |
質量部 |
驗證方案的起草；相關的取樣及檢驗；檢驗結果判斷（質量部 QC） |
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組員 |
質量部 |
負責驗證過程和驗證結果的復核（質量部 QC） |
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組員 |
工程部 |
負責滅菌鍋安裝確認和維修（工程部 主管） |
6.驗證計劃安排
本次驗證由質量部計劃在 年 月 日～ 年 月 日 分三次進行驗證。
7.驗證參數及判斷標準
參考依據：JJF1101-2003《環境試驗設備溫度、濕度校準范圍》。
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項目 |
溫度試驗設備 |
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溫度范圍 |
（0～100）℃ |
（-60～0）℃/（100～200）℃ |
（200～300）℃ |
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溫度偏差 |
±1.0℃ |
±2℃ |
±3℃ |
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濕度偏差 |
— |
— |
— |
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均勻度 |
溫度 |
1.0℃ |
2℃ |
3℃ |
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濕度 |
— |
— |
— |
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波動度 |
溫度 |
±0.5℃ |
±0.5℃ |
±2℃ |
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濕度 |
— |
— |
— |
#p#分頁標題#e#
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驗 證 參 數 |
判 斷 標 準 |
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安裝確認 |
安裝所需電源，供水情況，人員培訓和校驗應符合規定 |
|
運行確認 |
空載條件下，各項功能應與操作說明相符，且控溫良好 |
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熱分布測試 |
滅菌器腔內熱分布應符合規定（±2℃） |
|
熱穿透試驗 |
滿載條件下，滅菌器腔內熱空氣穿透力應符合規定（±2℃） |
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生物指示劑試驗 |
根據顏色判斷滅菌效果，培養48小時后, 陽性對照的培養液顏色由紫色變成黃色，滅菌過培養液顏色不變，則此滅菌程序符合規定 |
|
若陽性對照的培養液顏色由紫色變成黃色，滅菌過培養液顏色如由紫色變成黃色，則此滅菌程序不符合規定 |
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若陽性對照的培養液顏色不變，則本次實驗無效，必須重新進行試驗 |
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如已滅菌的生物指示劑經培養顯陽性，必須對滅菌程序重新選擇，直**符合規定 |
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營養試驗 |
營養瓊脂培養基上應無菌落生長 |
8.驗證內容
8.1 LDZX-75KBS立式壓力
蒸汽滅菌器簡述
滅菌器的工作壓力為0.155MPa，安全閥**高工作壓力為0.178 MPa±0.014 MPa。生產廠家：上海
申安醫療器械廠
8.2 安裝確認
8.2.1目的
檢查確認設備的資料是否齊全，整個安裝過程是否符合設計規范要求，制定設備校驗、使用SOP并納入文件管理系統。
確認對操作人員進行操作培訓并考核，納入培訓檔案。
8.2.2資料檔案
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名稱 |
編號 |
存放處 |
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使用說明書 |
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備件清單 |
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合格證 |
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開箱驗收記錄 |
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設備安裝調試驗收單 |
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設備卡 |
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8.2.3安裝確認
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項目 |
安裝要求 |
實際情況 |
結果 |
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電源功率 |
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供電電源 |
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安裝場所 |
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供水情況 |
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8.2.4 操作規程
編制LDZX-75KBS立式壓力
蒸汽滅菌器操作規程。
8.2.5人員培訓：對操作人員進行操作培訓并考核，納入培訓檔案。
8.3儀器校驗
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名稱 |
校驗單位 |
校驗日期 |
有效期 |
|
LDZX-75KBS立式壓力蒸汽滅菌器 |
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安裝確認結論：
#p#分頁標題#e#
記錄人： 復核人： 日期：
8.4運行確認
8.4.1測試目的：在不加載樣品的情況下試運行設備，確認滅菌器的各個部分在空載狀態下功能正常，與操作說明書相關條款相符，運行達到滅菌條件后，控溫功能良好。
8.4.2測試過程：各項操作準備就緒后，按照標準操作程序進行操作，設備運行后，各項功能和操作說明應相符，無明顯偏差。
測試人： 測試日期：
在121℃保溫15分鐘，控溫功能應良好，無明顯偏差。
測試人： 測試日期：
8.5熱分布測試
測試目的：檢查滅菌器腔內的熱分布情況，檢查箱腔內可能存在的冷點。
8.5.1驗證儀器的校正
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驗證儀器 |
留點溫度計 |
型號 |
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校驗單位 |
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校驗結果 |
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校驗日期 |
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有效期 |
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結論 |
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8.5.2空載熱分布
測試過程：取15支經過校驗的留點溫度計，將其中1支的探頭置于滅菌器的蒸汽進氣口處，1支探頭置于滅菌器排氣口處，1支探頭置于滅菌器的溫度控制和記錄的探頭旁邊，其余留點溫度計的分布在腔內的各處。開啟滅菌器，按照標準程序進行，運行過程中記錄儀器各個點的溫度，連續運行3次，檢查其重現性。
探頭分布圖：
上
下
剛到121℃時,各留點溫度計溫度
（表格數據單位℃；標準121℃±2℃，三次測量偏差±0.5℃）
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編號 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
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**次 |
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第二次 |
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第三次 |
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121℃穩定15分鐘時各留點溫度計溫度#p#分頁標題#e#
（表格數據單位℃；標準121℃±2℃，三次測量偏差±0.5℃）
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編號 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
|
**次 |
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第二次 |
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第三次 |
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8.5.3運行結果：
記錄人： 復核人： 日期：
8.5.4滿載熱分布
8.5.4.1測試過程：將滅菌器內裝滿內有300ml培養基的500ml錐形瓶，自下而上擺放。取15支經過校驗合格的留點溫度計，將1支的探頭置于滅菌器的蒸汽進氣口處，1支探頭置于滅菌器排氣口處，1支探頭置于滅菌器的溫度控制和記錄的探頭旁邊，其余留點溫度計的分布在腔內的各處。開啟滅菌器，按照121℃，15分鐘運行，運行過程中記錄各個點的溫度。連續運行3次，以檢查其重現性。溫度計分布同空載熱分布
（表格數據單位℃；標準121℃±2℃，三次測量偏差±0.5℃）
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編號 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
|
**次 |
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第二次 |
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第三次 |
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8.5.4.2運行結果： #p#分頁標題#e#
記錄人： 復核人： 日期：
8.6熱穿透試驗
熱穿透試驗是在熱分布試驗的基礎上，確定裝載中的“**冷點”，并肯定該店在滅菌過程中的無菌保證值，在121℃，FH≥15分鐘。
8.6.1驗證步驟
8.6.2裝載類型：**大裝載、滿載。
8.6.3器皿選擇：500ml錐形瓶。
滅菌程序：121℃×15分鐘。
8.6.4測試過程：在滿載情況下，取15支經過校驗合格的標準留點溫度計，將1支置于進氣口處的待滅菌瓶內，1支置于排氣口處的待滅菌瓶內，1支置于滅菌器溫度計測試點旁，其余溫度計置于待滅菌瓶中（如熱均勻分布圖）。
（表格數據單位℃；標準121℃±2℃，三次測量偏差±0.5℃）
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編號 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
|
**次 |
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第二次 |
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第三次 |
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8.6.5運行結果：
記錄人： 復核人： 日期：
8.7性能確認：
8.7.1驗證所涉及設施
8.7.1.1 LDZX-75KBS立式
壓力蒸汽滅菌器
8.7.1.2 ×××型隔水式恒溫培養箱
8.7.1.3 ×××垂直層流潔凈工作臺
8.7.1.4 ×××型電熱恒溫鼓風干燥箱#p#分頁標題#e#
8.7.1.5生物指示劑—嗜熱脂肪芽孢桿菌（ATCC 7953）（Bacillus Stearothermophilus） 為安瓿裝紫色培養液含菌。
相關參數：
8.7.2儀器儀表校驗要求
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名 稱 |
校驗單位 |
校驗
結論 |
校驗
日期 |
有效期 |
LDZX-75KBS立式壓力蒸汽
滅菌器 |
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×××型隔水式恒溫
培養箱 |
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×××型電熱恒溫
鼓風干燥箱 |
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8.7.3驗證方法
8.7.3.1細菌生物指示劑驗證
8.7.3.1.1取15支嗜熱脂肪芽孢桿菌指示劑，均勻分布于滅菌器的各層位置，其中3支置于熱穿透試驗的**冷點，按照操作規程進行滅菌操作，溫度121℃，滅菌時間15分鐘。
8.7.3.1.2經過一個滅菌周期后，取出嗜熱脂肪芽孢桿菌指示劑，放入培養箱中，在56～60℃培養箱中培養48小時，同時放1支未經滅菌處理的生物指示劑（編號：16）進行培養作為陽性對照。連續試驗三次。(“-”表示結果呈陰性；“+”表示結果呈陽性。)
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次數 |
編號 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
16 |
|
**次 |
結果 |
|
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第二次 |
結果 |
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|
第三次 |
結果 |
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8.7.3.1.3結果判定及評價： #p#分頁標題#e#
。
（每次檢測中，每支嗜熱脂肪芽孢桿菌指示劑呈藍紫色為合格，指示劑之一呈黃色為不合格）。
記錄人： 復核人： 日期：
8.7.3.2滅菌后培養基質量驗證
8.7.3.2.1按照《微生物限度檢查操作規程HZBSN-02-6》規定的檢查方法，從滅菌后的營養瓊脂培養基（廠家： ，批號 ）中每次取出12瓶（注意從滅菌器的不同位置）分別傾注平皿，同時做空白，35℃±1℃培養3天，記錄菌落生長情況。連續檢查3次。
（表格數據單位個/皿。）
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平皿號 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
空白 |
|
**次 |
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第二次 |
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|
第三次 |
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8.7.3.2.2驗證結果：
記錄人： 復核人： 日期：
8.8結論：
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驗證項目 |
結論 |
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安裝確認 |
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|
運行確認 |
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熱分布測試 |
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|
熱穿透試驗 |
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|
生物指示劑試驗 |
|
|
營養試驗 |
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#p#分頁標題#e#
9.偏差及變更處理
驗證過程中出現偏差時即使向驗證小組組長報告，糾偏措施經驗證小組組長同意并報質量部經理及驗證總負責人同意后執行。如情況緊急，可由驗證小組組長和QA員確認后執行糾偏措施，事后報質量部經理及驗證總負責人。出現偏差不進行糾偏，對驗證結果有嚴重影響的應取消驗證結果，重新驗證。驗證過程中如需變更驗證方案，按《驗證管理規程》執行。
10.驗證結果評價
驗證小組負責根據驗證情況，作出評定，依據《驗證管理規程》寫出驗證報告。
11.驗證結論
驗證結束后，驗證小組根據驗證結果，得出驗證結論，按《驗證管理規程》頒發證證書。
12.再驗證周期
由驗證小組根據驗證結果擬定再驗證周期。
13.驗證結果的實施
驗證結果的實施見《驗證管理規程》。
14.附錄
附錄1：驗證合格證書
附錄2：培養基配制及使用記錄（HZBSJ-02-1-1）。
