滅菌是指用物理或化學(xué)方法將所有致病和非致病的微生物全部殺滅。滅菌法是指殺滅或除去所有微生物的繁殖體和芽孢或孢子的技術(shù)。微生物包括細(xì)菌、真菌、病毒等。微生物的種類不同、則滅菌的方法不同，滅菌效果也不同。細(xì)菌的芽孢具有較強(qiáng)的抗熱能力，因此滅菌效果，常以殺滅芽孢為準(zhǔn)。消毒是指殺滅物體上的微生物的繁殖體，不能保證殺死芽孢或孢子。滅菌與消毒在藥品生產(chǎn)過程中是極為重要的，它是藥品生產(chǎn)過程中一項(xiàng)重要的操作，也是保證藥品質(zhì)量的重要措施之一。
滅菌涉及到廠房、設(shè)備、容器、潔具、工作服裝、原輔材料、成品、包裝材料、儀器等等的滅菌。無菌藥品特別是注射液、供角膜創(chuàng)傷或手術(shù)用滴眼劑等無菌制劑是直接進(jìn)入人體血液循環(huán)系統(tǒng)而產(chǎn)生療效的藥品，所以對(duì)其質(zhì)量有特殊要求，它必須符合藥典無菌檢查的要求，為此，在生產(chǎn)過程中，要努力消除微生物的污染，殺滅藥品中的微生物，這就是滅菌要達(dá)到的目的。
滅菌的方法基本上分為二大類：物理方法（干熱滅菌、濕熱滅菌、射線滅菌、濾過滅菌）和化學(xué)方法（氣體滅菌、藥液滅菌）。
下面將分別介紹幾種常用的滅菌方法。
**節(jié) 干熱滅菌法及其設(shè)備
1. 干熱滅菌
干熱可用于能耐受較高溫度，卻不宜被蒸汽穿透，或者易被濕熱破壞的物品的滅菌。同時(shí)干熱也是制藥工業(yè)中用于除熱原的方法之一。由于在相同的溫度下，干熱對(duì)微生物的殺滅效果遠(yuǎn)低于飽和蒸汽，故干熱滅菌需要較高的溫度或較長的滅菌時(shí)間。評(píng)價(jià)干熱法滅菌的相對(duì)能力時(shí)，一般可采用相似于F₀值的致死率單位和生物指示劑。F₀值與濕熱滅菌系統(tǒng)驗(yàn)證中使用的F₀值是將時(shí)間與濕度條件的改變折算成170℃時(shí)的相當(dāng)時(shí)間，同時(shí)設(shè)定Z值為20℃即F_H值。BP1993年版規(guī)定，僅以滅菌為**終日的干熱滅菌系統(tǒng)，必須保證其**小的F_H值大于170℃60min。對(duì)于采用干熱存活概率法滅菌的系統(tǒng)，驗(yàn)證結(jié)果應(yīng)能證明其滅菌過程保證對(duì)耐熱微生物的殺滅效果達(dá)到認(rèn)可的低存活概率，一般未被殺滅的概率為10^－6，即滅菌物品經(jīng)過滅菌后殘存微生物污染的可能性為百萬分之一。對(duì)于采用干熱過度殺滅法滅菌系統(tǒng)的驗(yàn)證結(jié)果，應(yīng)證明其滅菌過程保證對(duì)干熱呈高度耐受性的微生物產(chǎn)生大于12個(gè)log的遞減，取得低于10^－12的微生物存活概率，即滅菌物品經(jīng)過滅菌后殘存的微生物污染可能性低于百萬分之一，同時(shí)在做過度殺滅法滅菌過程驗(yàn)證時(shí)不需要做常規(guī)的帶菌量的估價(jià)。
2. 干熱滅菌的主要設(shè)備
3. 干熱滅菌的主要設(shè)備有干熱滅菌柜、隧道滅菌系統(tǒng)。干熱滅菌設(shè)備一般由下列幾個(gè)重要部分組成：
1. 加熱器―――它是干熱滅菌設(shè)備的主要組成部分，對(duì)滅菌效果的好壞影響極大。加熱器故障是造成干熱滅菌設(shè)備滅菌效果下降的主要原因之一，其主要表現(xiàn)為升溫速度下降；影響熱分布；產(chǎn)生塵埃物質(zhì)。而造成加熱器故障的原因，主要是加熱器的長期使用或通過加熱器的空氣質(zhì)量較差所致。所以一般應(yīng)在滅菌器的加熱系統(tǒng)配置電流監(jiān)測器，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)其故障。
2. 高效過濾器―――在干熱滅菌設(shè)備中，進(jìn)風(fēng)應(yīng)通過高效過濾器；除去內(nèi)部空氣循環(huán)系統(tǒng)中產(chǎn)生的塵埃物質(zhì)需要高效過濾器；防止排風(fēng)倒流的污染也可裝高效過濾器。所以高效過濾器必須滿足干熱滅菌工藝用風(fēng)量的要求，并能承受相應(yīng)的風(fēng)壓。
3. 緩沖板、風(fēng)閥、氣流調(diào)節(jié)器或空氣檔板―――緩沖板或空氣檔板用于控制干熱滅菌器的空氣流量，多安裝于進(jìn)風(fēng)或排風(fēng)風(fēng)管或加熱器附近，用于正壓控制的氣流調(diào)節(jié)器可以安裝排風(fēng)系統(tǒng)中的防止倒流風(fēng)污染的高效過濾器附近，通過控制排風(fēng)量控制正壓，也可以用氣流調(diào)節(jié)器控制進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)風(fēng)量以保持正壓。一般情況下，干熱滅菌器腔室內(nèi)的壓力略高于其相臨的非無菌區(qū)而略低于其相臨的無菌區(qū)。
4. 風(fēng)機(jī)―――對(duì)干熱滅菌器中的氣流循環(huán)影響很大，風(fēng)機(jī)的風(fēng)量應(yīng)該可以測量，并可
調(diào)整，必要時(shí)可以要求供應(yīng)商將此項(xiàng)要求增加到其設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)中，因?yàn)轱L(fēng)機(jī)風(fēng)量的測量指示值，可以為設(shè)備使用過程中檢查風(fēng)機(jī)狀態(tài)提供依據(jù)。
5．傳送帶（僅適用于連續(xù)法）―――傳送帶的速度，在連續(xù)傳送干熱滅菌系統(tǒng)中是十分重要的滅菌效果影響因素。目前大多數(shù)干熱連續(xù)法滅菌系統(tǒng)中已設(shè)有傳送帶速度控制器，但較少有速度記錄裝置。由于傳送帶速度決定了物料經(jīng)過滅菌器時(shí)所接受的熱量，所以其速度記錄是證明滅菌器在控制狀態(tài)下運(yùn)行的基本資料之一，生產(chǎn)工藝中亦有必要保存每次滅菌過程的傳送速度的記錄。同時(shí)干熱滅菌器的SOP，也應(yīng)明確規(guī)定各種滅菌過程傳送帶的運(yùn)行速度范圍，此運(yùn)行速度范圍應(yīng)是經(jīng)過驗(yàn)證確定的。
6．運(yùn)行連鎖控制系統(tǒng)―――干熱滅菌器中連鎖控制系統(tǒng)設(shè)有：門連鎖控制系統(tǒng)；壓力傳感器；溫度傳感、控制、停止傳送帶運(yùn)行的連鎖控制裝置等，以保證在任何情況下出現(xiàn)溫度低于設(shè)計(jì)要求時(shí)防止滅菌物品在低于滅菌溫度的情況下通過滅菌器。
7. 溫度控制器及記錄儀―――在干熱滅菌系統(tǒng)中，溫度探測、傳感、控制、記錄系統(tǒng)
是整個(gè)滅菌過程控制的基礎(chǔ)，其控制系統(tǒng)必須能保證滅菌器腔室內(nèi)滅菌溫度可以保持在設(shè)定的滅菌溫度范圍內(nèi)，其記錄系統(tǒng)必須將溫度探測、傳感系統(tǒng)的溫度讀數(shù)準(zhǔn)確無誤地記錄清楚。#p#分頁標(biāo)題#e#
第二 節(jié)濕熱滅菌法及其設(shè)備
1. 濕熱滅菌法
是在飽和蒸汽或沸水或流通蒸汽中進(jìn)行滅菌的方法。由于蒸汽潛熱大，穿透力強(qiáng)，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固，所以滅菌效率比干熱滅菌法高。這是注射劑生產(chǎn)中應(yīng)用**廣泛的一種滅菌方法，它具有滅菌可靠，操作方便，易于控制和經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)。
影響濕熱滅菌的因素有：
1. 細(xì)菌的種類與數(shù)量：不同細(xì)菌，同一細(xì)菌的不同發(fā)育階段對(duì)熱的抵抗力有所不同。
細(xì)菌數(shù)越少，滅菌時(shí)間越短。
2. 藥物性質(zhì)與滅菌時(shí)間：一般來說，滅菌溫度越高滅菌時(shí)間越短。但考慮到藥物的穩(wěn)
定性，應(yīng)在達(dá)到有效滅菌的前題下可適當(dāng)降低滅菌溫度或縮短滅菌時(shí)間。
3. 蒸汽的性質(zhì)：蒸汽有飽和蒸汽，濕飽和蒸汽和過熱蒸汽。飽和蒸汽熱含量較高，熱穿透力較大，因此滅菌效力高。濕飽和蒸汽帶有水分，熱含量較低，穿透力差，滅菌效力較低。過熱蒸汽溫度高于飽和蒸汽，但穿透力差，滅菌效率低。
4. 介質(zhì)的性質(zhì)：制劑中含有營養(yǎng)物質(zhì)，如糖類、蛋白質(zhì)等，增強(qiáng)細(xì)菌的抗熱性。細(xì)菌的生存能力也受介質(zhì)PH值的影響。一般中性環(huán)境耐熱性**大，堿性次之，酸性不利于細(xì)菌發(fā)育。
1. 濕熱滅菌法的主要設(shè)備
濕熱滅菌法的主要設(shè)備是滅菌釜，滅菌釜種類很多，性能差異也很大，但其基本結(jié)構(gòu)大
同小異，所用的材質(zhì)為堅(jiān)固的合金。現(xiàn)在G內(nèi)很多企業(yè)使用的方型高壓滅菌釜，能密閉耐壓，有排氣口、安全閥、壓力和溫度指示裝置。帶有夾套的滅菌柜備有帶軌道的格車，分為若干格。滅菌柜頂部裝有壓力表二只，一只指示蒸汽夾套內(nèi)的壓力，另一只指示柜室內(nèi)的壓力，兩壓力表中間為溫度計(jì)。滅菌柜的上方還應(yīng)安裝排氣閥，以便開始通入加熱蒸汽時(shí)排除不凝性氣體。近年來，一些制藥企業(yè)已經(jīng)開始采用具有抽真空能力及F₀控制的蒸汽滅菌釜，目前G內(nèi)使用的進(jìn)口滅菌釜主要有二種：一種以蒸汽為滅菌介質(zhì)的旋轉(zhuǎn)式滅菌釜，如奧地利的HDRR009．20／IS，另一種以過熱水作介質(zhì)的噴淋式滅菌釜，如意大利FEDEGARI公司的FOW5－500。進(jìn)口滅菌釜的主要優(yōu)點(diǎn)是批次量較大，溫度控制系統(tǒng)準(zhǔn)確度及精密較好，產(chǎn)品滅菌過程中受熱比較均勻。
滅菌釜的基本滅菌程序?yàn)椋?br /> 裝瓶     升溫、進(jìn)蒸汽置換空氣     滅菌     排汽    預(yù)熱水冷卻    卸壓
第三節(jié) 其他滅菌方法及消毒方法
一、輻射滅菌法
以放射性同位素，（⁶⁰C_O或¹³⁷C_S）放射的g 射線殺菌的方法。射線可使有機(jī)化合物的分子直接發(fā)生電離，產(chǎn)生破壞正常代射的自由基，導(dǎo)致微生物體內(nèi)的大分子化合物分解。輻射滅菌的特點(diǎn)是不升高滅產(chǎn)品的溫度，穿透性強(qiáng)，適合于不耐熱藥物的滅菌，醫(yī)療器械、高分子材料、包裝材料等的滅菌。滅菌劑量一般用2.5×10⁴GY（弋瑞）。此法已為《英G藥典》（1998），《日本藥局方》十三版所收載。我G有些企業(yè)亦用⁶⁰C_O對(duì)某些中藥和醫(yī)療器械進(jìn)行滅菌。輻射滅菌，設(shè)備費(fèi)用高，對(duì)某此藥品可能產(chǎn)生藥效降低，產(chǎn)生毒性物質(zhì)或發(fā)熱物質(zhì)，使用輻射滅菌還應(yīng)注意安全防護(hù)措施。
二、紫外線滅菌法
是指用紫外線照射殺滅微生物方法。一般用于滅菌的紫外線波長是200~ 300nm，滅菌力**強(qiáng)的波長是253.7nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性，同時(shí)空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。紫外線進(jìn)行直線傳播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但較易穿透清潔空氣及純凈的水。因此本法適用于照射物體表面之滅菌、無菌室的空氣及水的滅菌；不適用于藥液的滅菌、固體物質(zhì)深部的滅菌；普通玻璃可吸收紫外線，因此裝于玻璃容器中的藥物不能用此法滅菌。紫外線對(duì)人體照射過久，會(huì)發(fā)生結(jié)膜炎，紅斑及皮膚燒灼等現(xiàn)象，故一般在人入室前開啟紫外線燈1~ 2小時(shí)，關(guān)閉后人才進(jìn)入潔凈室，如果必須在人進(jìn)去后仍要開紫外線滅菌，則人的皮膚及眼睛應(yīng)有有效的防護(hù)措施。
用紫外線照射滅時(shí)要注意下列問題：
1．紫外線的殺菌力，隨使用時(shí)間增加而減退，一般使用時(shí)間達(dá)到額定時(shí)間70％時(shí)應(yīng)更換紫外線燈管，以保證殺菌效果。G產(chǎn)紫外線燈平均壽命一般為2000h。
2．紫外線的殺菌作用隨菌種不同而不同，殺霉菌的照射量要比殺桿菌大40~ 50倍。
3．紫外線照射通常按相對(duì)濕度為60％的基礎(chǔ)設(shè)計(jì)，室內(nèi)濕度增加時(shí)，照射量應(yīng)相應(yīng)增加。
4．紫外線滅菌效果與照射的時(shí)間長短有關(guān)，這需要通過驗(yàn)證來確定照射時(shí)間。
1. 紫外照射燈的安裝形式及高度，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況，參考使用說明決定。
三．環(huán)氧乙烷滅菌法
環(huán)氧乙烷滅菌法是利用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行殺菌的方法。它是一種傳統(tǒng)的滅菌方法，可應(yīng)用于工衣滅菌、不耐加熱滅菌的藥品、醫(yī)用器具、設(shè)施、設(shè)備等滅菌。環(huán)氧乙烷滅菌系統(tǒng)，主要有下列四項(xiàng)互相制約的重要因素影響滅菌效果：
1. 濕度；
2. 溫度；
3. 氣體濃度；
4. 滅菌時(shí)間。
因?yàn)榄h(huán)氧乙烷是易燃易爆物質(zhì)，明火可以引起燃燒，同時(shí)由于氣體分解不可能引起爆炸，環(huán)氧乙烷滅菌中應(yīng)十分注意安全問題。
環(huán)氧乙烷具有非常強(qiáng)的滲透和擴(kuò)散能力，其滅菌的機(jī)理主要是強(qiáng)氧化，因此具有殺菌譜廣，滅菌能力強(qiáng)的特點(diǎn)，對(duì)微生物的繁殖體、芽孢有較強(qiáng)的殺滅效果。雖然環(huán)氧乙烷在高濃度時(shí)有刺激性臭味和毒性，但屬中度毒性，一般可以很快揮發(fā)，不會(huì)在系統(tǒng)內(nèi)表面殘留余毒。#p#分頁標(biāo)題#e#
用環(huán)氧乙烷氣體滅菌的程序,大致為將滅菌物品置于滅菌器內(nèi)，減壓排除空氣，預(yù)熱，環(huán)氧乙烷氣體采用混合氣（一般環(huán)氧乙烷氣體含10~ 20％，二氧化碳含80~ 90％），在減壓下輸入混合氣體，保持一定濃度、溫度和濕度，經(jīng)過一定時(shí)間后，抽真空排除環(huán)氧乙烷氣體，然后送入無菌空氣置換環(huán)氧乙烷氣體，直**排凈。
四、濾過滅菌法
濾過滅菌法是用濾過方法除去活的或死的微生物的方法，是一種機(jī)械除菌方法，這種機(jī)械叫除菌過濾器。主要用于對(duì)熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水的滅菌。供滅菌用的濾器，要求能有效地從溶液中除凈微生物，溶液順暢地由濾器通過，濾液中不落入任何不需要的物質(zhì)，濾器容易清洗，操作簡便。
繁殖型細(xì)菌很少小于1m m的，芽胞大小為0.5m m或更小些。所以，對(duì)于以過篩作用濾過的濾器，例如纖維素酯膜濾器，其孔徑大小必須小到足以阻止細(xì)菌和芽孢進(jìn)入濾孔之內(nèi)，孔徑約為0.2m m。靠阻留于孔道內(nèi)或靜電作用的濾器，孔徑可稍大于所要濾除的顆粒，但壓力過大或波動(dòng)，顆粒就有被擠過的可能。**常用測定孔徑的方法，是用大小為0.7m m左右的靈菌（B．prodigilsus）混懸液濾過，濾液通過培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，觀察有無靈菌生長。常用除菌濾器有微孔薄膜器，摺疊式纖維素濾棒，一般選用孔徑0.22m m。濾過法應(yīng)配合無菌操作技術(shù)，并必須對(duì)成品進(jìn)行無菌檢查，以保證其除菌質(zhì)量。
5. 臭氧消毒法
臭氧（O₃）的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧（O₂）和單個(gè)氧原子（O），后者具有很強(qiáng)的活性，對(duì)細(xì)菌有極強(qiáng)的氧化作用,臭氧氧化分解了細(xì)菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會(huì)自行重新結(jié)合成為普遍氧分子（O₂），不存在任何有毒殘留物，故稱為無污染消毒劑。它不但對(duì)各種細(xì)菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等）有極強(qiáng)的殺來滅能力，而且對(duì)霉菌也很有效。
生產(chǎn)臭氧的原料主要是電能和空氣，一般通過高頻臭氧發(fā)生器（電子消毒器）來獲得，消毒時(shí),直接將臭氧發(fā)生器直于房間中間即可。
臭氧消毒效果的驗(yàn)證中需確誶和校正的臭氧發(fā)生器技術(shù)指標(biāo)有：臭氧產(chǎn)量、臭氧濃度和時(shí)間定時(shí)器，并通過驗(yàn)證檢查細(xì)菌數(shù)來確定消毒時(shí)間。
6. 甲醛消毒方法
1. 計(jì)算房間體積，按10g/m³的比例秤出甲醛。
2. 將甲醛倒甲醛發(fā)生器或加熱盤或燒杯中，并放好加濕用水，必要時(shí)還可加入高錳酸
鉀（2~ 3g/m³ ）,然后加熱（甲醛發(fā)生器用蒸汽加熱，加熱盤或燒杯可用熱水盛入其中加熱）使其蒸發(fā)成氣體。
3．滅菌流程：空調(diào)器停止運(yùn)轉(zhuǎn)→啟動(dòng)甲醛氣體發(fā)生器或在加熱盤中熱甲醛→讓甲醛氣體擴(kuò)散約30分鐘→啟動(dòng)空調(diào)器讓甲醛氣體循環(huán)約30分鐘→ 停止空調(diào)器，房間熏蒸消毒，時(shí)間不少于8小時(shí)→房間排氣，用新鮮空氣置換約2小時(shí)→恢復(fù)正常運(yùn)行。
當(dāng)相對(duì)溫度在65％以上，溫度在24－40℃時(shí)，甲醛氣體的消毒效果**好。
甲醛消毒滅菌的氣體發(fā)生量、熏蒸時(shí)間，換氣時(shí)間等應(yīng)以驗(yàn)證結(jié)果來**后確定。
5. 消毒劑消毒
潔凈室的墻面、天花板、門窗、機(jī)器設(shè)備、儀器、操作臺(tái)、車、桌、椅等表面以及人體雙手（手套）在環(huán)境驗(yàn)證及日常生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)定期清潔并用消毒劑噴灑。常見的消毒劑有異丙醇（75％）、乙醇（75％）戊二（1％）、新潔而滅（0.1~ 0.2％）等。亦可用0.5~ 3%石碳酸或2~ 5％的甲苯酚。
無菌室用的消毒劑必須在層流工作臺(tái)中，用0.22μm的濾膜過濾后方能使用。
第四節(jié)滅菌管理要點(diǎn)
一、選用濾過器材和處理方法應(yīng)符合工藝要求，微孔濾膜使用前后應(yīng)作完整性試驗(yàn)，以保證其滅菌效果。
二、藥液從配制到滅菌開始，其間隔不得超過工藝規(guī)定的時(shí)間。
三、滅菌應(yīng)有溫度、壓力及升溫時(shí)間、恒溫時(shí)間、數(shù)量及全過程的溫度壓力曲線圖或溫度曲線圖。
四、按批號(hào)進(jìn)行滅菌，不得混批。滅菌前后的中間產(chǎn)品應(yīng)有可靠的防混措施。
五、滅菌設(shè)備使用前都必須進(jìn)行驗(yàn)證，工藝改變或大修后，要進(jìn)行再驗(yàn)證，以確保滅菌效果。
六、滅菌釜宜選擇雙扉式的滅菌釜，使用前應(yīng)進(jìn)行溫度均勻性和滅菌效果的驗(yàn)證，并有記錄，F(xiàn)₀值應(yīng)控制在8.0以上。
七、直接接觸藥品的包裝材料、設(shè)備和其他物品的從滅菌到使用時(shí)間間隔應(yīng)有規(guī)定。
5. 當(dāng)一個(gè)批號(hào)產(chǎn)品使用多個(gè)滅菌柜滅菌時(shí)，應(yīng)加亞批號(hào)。
6. 使用消毒劑消毒時(shí)，應(yīng)有二個(gè)以上消毒劑輪換使用，以防止產(chǎn)生耐藥菌株。
第五節(jié) 蒸汽滅菌釜驗(yàn)證
蒸汽滅菌驗(yàn)證，一般的驗(yàn)證步驟如下：
1. 驗(yàn)證方案的制訂；
2. 驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)；
3. 儀表及文件的準(zhǔn)備；
4. 預(yù)確認(rèn)；
5. 安裝確認(rèn)―――電氣安裝、蒸汽安裝、冷卻水安裝；
6. 運(yùn)行確認(rèn)―――單機(jī)或系統(tǒng)試車；
7. 性能確認(rèn)―――熱分布測試、熱穿透性試驗(yàn)、生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)、微生物孢子的挑戰(zhàn)性試驗(yàn)；
8. 驗(yàn)證報(bào)告―――數(shù)據(jù)分析、驗(yàn)證結(jié)果、評(píng)價(jià)和建議；
9. 批準(zhǔn)結(jié)論。
蒸汽滅菌釜驗(yàn)證如何進(jìn)行，原G家醫(yī)藥管理局推行GMP、GSP委員會(huì)編的《藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南》（1996年4月出版）P263附錄四“滅菌釜驗(yàn)證示例”可作參考。#p#分頁標(biāo)題#e#